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MGISEQ-2000RS FluoXpert全新試劑盒上線,實現高達20+靶標蛋白染色

時間:2024-11-20作者:華大智造閱讀數:10783分享

今年4月份,華大智造正式推出MGISEQ-2000RS FluoXpert(以下簡稱“FluoXpert”)多組學分析儀。這也是中國首款具有自主知識產權、集成了病理切片染拍功能和測序功能的基因測序儀,也是一臺能夠做病理組織染拍空間蛋白組學的測序儀。為滿足醫學科研用戶在組織切片空間蛋白組學研究中的高標準需求,華大智造全新推出搭配FluoXpert平臺使用的24色多重免疫熒光試劑套裝,可支持高達23個標記物及細胞核的染色。


在傳統病理學和轉化醫學研究領域,組織切片的蛋白表達分析主要依賴于蘇木精-伊紅染色(Hematoxylin-eosin staining,H&E)和免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)。然而,H&E染色僅限于提供定性結果,傳統IHC染色則無法在單張組織切片上進行多個蛋白表達的檢測。


多重免疫熒光技術(Multiplex Immunofluorescence,mIF)打破了這一局限,它能夠在一張切片上同時檢測多個目標蛋白,保留了寶貴的空間信息,這對于深入理解組織微環境和細胞間相互作用至關重要。多重免疫熒光揭示了不同細胞群之間的空間位置關系,可進一步提升病人的預后評估,對靶向藥物的開發、空間標志物的發現有著重要的作用。


FluoXpert基于目標抗原&一抗&熒光二抗特異性結合的生化原理,通過其染色-拍照-洗脫的多輪循環流程,實現了對單張切片的多重目標蛋白檢測。其精密的機械設計、先進的流體控制系統、獨特的生化工藝和高效的光路系統共同確保了檢測的高靈敏度和組織切片多重標記物空間定位的準確性。


FluoXpert染色試劑盒上新

實現高達20+靶標蛋白染色


此次升級的24色多重免疫熒光試劑套裝——FluoXpert多重免疫熒光試劑套裝(SS 24P/ SL 24P/ DL 24P),套裝同樣可選擇性搭配三種不同型號的載片(SS/SL/DL),支持高達23個標記物及細胞核的染色。該試劑套裝簡單易用,可支持FFPE石蠟切片和新鮮冷凍FF切片,兼容市售一抗,用戶無需對一抗進行特殊的偶聯處理,稀釋后加入試劑盒中即可上機進行全自動的多重染色,24色染色流程可在12小時內完成,極大地簡化實驗手動操作流程,提高科研效率。


不同于傳統的多重免疫熒光技術(Tyramide signal amplification,TSA),FluoXpert試劑盒每次可進行兩種蛋白的染色,抗體上所帶的熒光信號串擾少,信號更準確。而TSA方式針對不同目標蛋白需要用不同的熒光基團進行信號標記,多重染色后切片上同時存在多種熒光染料(如圖1.1),后期需要通過光譜拆分還原不同的熒光信號,顏色越多,光譜拆分難度越大。使用FluoXpert可以有效避免TSA方法帶來的光譜串擾問題(圖1.2),輕松達到20+目標蛋白的染色效果。



圖1.1:基于TSA的mIHC染色原理,9色多重免疫熒光譜圖



圖1.2:FluoXpert多重免疫熒光使用的雙熒光通道


四大黑科技集聚

FluoXpert 24-plex試劑盒


01 集成高效自發熒光去除試劑,有效去除組織切片的自發熒光信號;圖2(a-b)

02 載片鍍層處理,金屬鍍層使激光進行二次反射,激發效率加倍;圖2(c)

03 抗體增強劑,有效提高抗體結合效率,進而節省一抗用量及孵育時間

04 高效溫和的洗脫技術,多達19輪循環染色,信號強度波動小于7%, 圖3



圖2. (a-b) 鼠腦石蠟切片在試劑盒自發熒光試劑作用下,組織本身自發熒光可降低3-5倍;(c) 載片鍍層作用下使激發效率增強~150%



同一切片經過19輪染色結果表明多輪染色信號穩定,且可精準實現多輪的圖像對齊



圖3. 同一切片經過19個循環染色后同一標記物信號波動小于7%


不同樣本類型驗證


FluoXpert實測數據高效可靠


1.樣本類型:扁桃體石蠟切片染色重數:22重標記物+核染色研究領域:抗體Panel開發測評機構:Dr. Joe Yeong(新加坡)實測結論:FluoXpert平臺可實現20+蛋白的染色,各marker間信號串擾少,可精確揭示不同細胞群體的空間分布,為空間蛋白組學研究提供高效可靠的技術平臺。


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2.樣本類型:食管癌石蠟切片染色重數:9重標記物+核染色研究領域:腫瘤免疫測評機構:華南某用戶實測結論:FluoXpert的mIF染拍功能可與單細胞測序、時空組學結合,實現基因及蛋白層面的多組學分析,為腫瘤免疫微環境深入研究提供新思路。


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3.樣本類型:食管癌石蠟切片染色重數:15重標記物+核染色研究領域:抗體開發測評機構:西南某用戶實測結論:FluoXpert多重免疫熒光自動染拍功能為抗體開發提供了高效驗證工具。


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4.樣本類型:人子宮內膜冷凍切片染色重數:13重標記物+核染色研究領域:妊娠過程分子機制研究 測評機構:華南某用戶實測結論:結果表明FluoXpert的多重免疫熒光染拍功能在冷凍切片上表現優異,抗體染色特異性較高,細胞定位準確,成像效果好,能很好的實現多種蛋白表達的共定位分析。


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5.樣本類型:植物愈傷組織石蠟切片染色重數:4重標記物+核染色研究領域:植物再生的機制研究 測評機構:華東某用戶實測結論:FluoXpert 樣本兼容性高,且一抗無需特殊偶聯處理,使得我們的植物樣本多重蛋白染色在FluoXpert平臺得以實現,為植物再生的機制研究擴寬思路。


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